顯微鏡資訊:克服高分辨率顯微鏡失焦的障礙!
但是,超高分辨率顯微鏡也會遇到失焦的障礙嗎?當我們通過對位于反射光中心的一個點(或分子)顯微觀察時,會發(fā)生衍射。體視顯微鏡一臺儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉的,當載物臺上放入單折射的物質時,無論如何旋轉載物臺,由于兩個偏振片是垂直的,顯微鏡里看不到光線,而放入雙折射性物質時,由于光線通過這類物質時發(fā)生偏轉,因此旋轉載物臺便能檢測到這種物體。熒光顯微鏡以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。但是當我們想要觀察物體時,會出現(xiàn)兩個以上的反射光點,這時兩個以上的光點會重疊現(xiàn)象,因此我們無法找到被觀察物體的真實位置。也就是說,研究人員必須有辦法在任何時候打開和關閉來自每個觀察分子的光。要做到這一點,研究人員必須通過基因工程將這些細胞改造成熒光蛋白質體,原則上兩束激光只能制造出幾個研究人員想要同時觀察發(fā)光的分子,因此,這些熒光細胞成為顯微鏡觀察的焦點。當研究人員用這種方法觀察細胞表面的一部分時,他們將不得不一遍又一遍地重復同樣的步驟,直到觀察到所有的表面組織。另一方面,如果細胞沒有經過基因工程改造而發(fā)出熒光,科學家就無法研究細胞表面的分子結構,也無法在一瞬間掌握分子軌跡,而經過基因改造的熒光分子可以持續(xù)不到一秒鐘。
現(xiàn)在,分子無線光學研究中心和神經突觸細胞生理學實驗室(隸屬于美國國家科學院和波爾多大學研究實驗室)的生物學家發(fā)明了一種新技術,可以讓細胞和分子“發(fā)光”。原理是使用immuno-marquage en temps reel。將被檢測的活細胞放入含有熒光抗體的溶液中(這種溶液市面上有售,使用的抗體要根據觀察對象而變化),使熒光抗體整合到細胞中。然而,研究人員不需要用這種抗體感染所有細胞,而是將熒光染料注入顯微鏡。在觀察過程中,部分抗體會自動與待觀察分子結合,使其發(fā)光。然后,當這部分熒光消失后。
這項工程技術企業(yè)得以讓研究工作人員紀錄數以千計的單一細胞分子之運動發(fā)展軌跡,并且學生可以奈米層級觀察中國這樣的動態(tài)現(xiàn)象,國家社會科學理論研究數據中心與波爾多大學的研究員也向世人展示了這項信息技術方面具有一定高度重視效率問題以及可在各種方式不同的細胞免疫系統(tǒng)(異質細胞、突狀纖維細胞或我們對于一般所說的神經細胞)內觀察內膜組織中的各種分子。這項技術教學不僅需要使用一些簡單、用途廣、并且也是十分可靠,從今以后一般大眾就算自己沒有文化傳統(tǒng)的光學顯微設備也可以有效細部的細胞分子觀察。更特別的是,我們公司甚至也可以以每秒50奈米的解析度拍攝諸如神經元等單一細胞的活動時間變化(相當于一般攝影中每秒20個畫面)。波爾多大學的研究領域學者已經逐漸開始以此觀察活體神經突觸內神經接受器的動態(tài)經濟結構。